材料與方法

       將三角形橡膠密封條和醫(yī)用乳膠管用市售強力膠封閉內箱接縫處及玻璃內門：除去箱頂溫度計，箱內掛入干濕溫度計(可在玻璃內門處觀察溫、濕度)：原溫度計孔以橡膠塞密封后打孔安裝二氧化碳培養(yǎng)箱入氣管和排氣管，連接CO2鋼瓶與CO2入氣管，排氣管用鐵夾夾閉；

       普通氧氣流量表控制CO2流量，濕化瓶內盛10硫酸銅水溶液(可抑制霉菌生長)；內箱底層置一方盤盛水(可保持箱內相對濕度在70以上)。測量內箱長、寬、高，計算容積為600m3,開放排氣管，調節(jié)CO2流量在10升：分，持續(xù)3分鐘，進氣30升。此時箱內CO2理論含量應為50,夾閉排氣管。

       我們用CO2檢測管測得CO2實際含量為5±0.20.24小時后CO2含量下降約0.50,左右，可用CO2持續(xù)微量補充(以20個氣泡分計)來衡定控制溫度在370.5℃

       使用注意

       1.環(huán)境盡量保持清潔二氧化碳培養(yǎng)箱定期熏蒸消毒，及時更換濕化瓶內的硫酸銅溶液，以防止霉菌生長和支原體污染。

       2.平時短、頻繁地開啟可不必補充CO2,使用完畢后按要求及時重新調整CO2含量。

       3.由于該二氧化碳培養(yǎng)箱外門無電熱裝置，導致玻璃門內外溫差而出現的冷凝水，一般無不良影響。有條件者可在外門夾層加電熱絲解決。

       4.因箱內無氣體循環(huán)系統，CO2與空氣混勻度未必一致，但實驗結果證明并無影響。
討論我們應用該二氧化碳培養(yǎng)箱進行載脂蛋白B100單克隆抗體(apo100cab)雜交瘤細胞系的建株實驗，獲得成功。培養(yǎng)的小鼠SP20-Ag14骨髓瘤細胞系及小鼠脾細胞、腹腔巨噬細胞、雜交瘤細胞等均生長良好，平均融合率為666克隆化培養(yǎng)后所獲的3株apoB0 ) McAb雜交瘤細胞系誘生的腹水中McAb效價均為1:3200( ELISA)：細胞株經液氮保存、傳代與凍融一年多，仍能持續(xù)穩(wěn)定地分泌高滴度的McAb實踐證明，這一裝置性能穩(wěn)定，使用方便，經濟可靠，并可根據需要調整CO依度，可*替代昂貴的自動CO2孵箱，對普通實驗室及基層單位進行細胞培養(yǎng)和制備單充隆抗體具有廣泛的推廣價值。

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